|
|
|
Иммунологический анализ крови проводится с целью выявления изменений
количества защитных белков и изменения количества или нарушения функций защитных
клеток крови – лейкоцитов.
Нет какого-то одного «стандартного набора» показателей, который
нужно обязательно сделать каждому
пациенту, т.к. программа иммунологического обследования каждого конкретного
пациента составляется из разных тестов на основе картины самого заболевания.
Поэтому я сначала приглашаю пациентов на консультацию (со всей
имеющейся медицинской документацией!), и уже на консультации составляется
конкретный план обследования конкретного человека. В серьезных случаях требуются
не только иммунологические анализы, но и биохимические, и
бактериологические, и инструментальные (УЗИ, рентген, спирометрия, ЭЭГ и
пр.)
|
ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ
|
|
Состав крови в норме
Циркулирующие
клетки иммунной системы
Эритроциты
Тромбоциты
Лейкоциты
Защитные белки
в плазме крови
Иммуноглобулины
Белки системы
комплемента
Лизоцим
Интерфероны
С-реактивный белок
|
ОПИСАНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУНОГРАММЫ
|
|
Концентрация
иммуноглобулинов классов G, A, M
Активность
комплемента
Титр ревматоидного фактора
Фагоцитарная
активность нейтрофилов
НСТ-тест
Определение T-,
B- и NK-лимфоцитов
Реакция бласттрансформации лимфоцитов
Реакция
торможения миграции лейкоцитов
|
Состав крови в норме
|
Циркулирующие клетки иммунной системы в крови
В крови постоянно циркулируют 3 типа клеток:
Эритроциты
- красные кровяные клетки. Их основная функция – переносить
кислород из легких в ткани и углекислый газ – в обратном направлении. Эти
клетки содержат белок красного цвета – гемоглобин, благодаря которому они и
могут переносить кислород.
Одна из дополнительных функций эритроцитов – сорбционная. На мембране
эритроцитов сорбируются защитные белки – антитела, иммунные комплексы,
обломки клеток; антитела, адсорбированные на мембране эритроцитов, могут
связывать бактериальные и вирусные токсины, обломки бактерий и некоторые
вирусы. Затем эритроциты с током крови попадают в селезенку и там
«разгружаются» от тех антигенов и иммунных комплексов, которые они
адсорбировали на своей мембране.
Тромбоциты
- кровяные пластинки. При повреждениях стенки сосудов тромбоциты
быстро склеиваются между собой и в сочетании с фибрином (специальным белком
плазмы крови) образовывают тромбы. Тромбы перекрывают повреждения в
кровеносных сосудах и останавливают кровотечение.
Кроме остановки кровотечения, тромбы выполняют и защитную функцию – они
препятствуют проникновению инфекции извне через поврежденную кожу или
слизистую оболочку, а также проникновению инфекции, уже попавшей в сосуды,
из крови в ткани.
Лейкоциты
- белые кровяные клетки. Собственно, лейкоциты – это и есть
циркулирующие в крови клетки иммунной системы, выполняющие разнообразные
защитные функции. В отличие от эритроцитов и тромбоцитов, лейкоциты –
весьма неоднородная группа клеток, которую подразделяют на следующие виды:
Нейтрофилы.
В крови взрослого человека
среди лейкоцитов преобладают нейтрофилы – 50 – 72% от общего количества
лейкоцитов в крови. Нейтрофилы способны атаковать чужеродные частицы
(вирусы, микробы, клетки грибков), и их фагоцитировать
(т.е. поглощать и переваривать). Нейтрофилы фагоцитируют
также конгломераты из чужеродных молекул и антител (иммунные комплексы), а
также обломки собственных погибших клеток организма. Особенно
активно нейтрофилы «пожирают» вирусы, бактерии, уже обработанные антителами
(эффект «опсонизации»).
Нейтрофилы – основные «дворники» внутренней среды, именно от их постоянной
активности зависит своевременное освобождение организма от всяких «шлаков».
Лимфоциты.
Лимфоциты преобладают в крови
детей со второй недели жизни и до 5-ти летнего возраста. От активности
лимфоцитов зависит становление долгосрочного иммунитета к большинству
инфекций, с которыми человек сталкивается в жизни или в результате активной
иммунизации (прививок). От них же зависит выработка защитных белков –
антител. В свою очередь лимфоциты принято разделять на
несколько популяций, основными из которых являются
следующие 3 популяции:
Т-лимфоциты.
Называются так потому, что одна из стадий их созревания проходит в тимусе (thymus - вилочковая железа). В организме Т-лимфоциты
выполняют функцию «диспетчеров» иммунного ответа, подавая разнообразные
химические сигналы другим клеткам иммунной системы. Один из подвидов
Т-лимфоцитов – цитотоксические Т-лимфоциты, могут уничтожать собственные
клетки организма, если с теми прореагировали антитела (собственные или
введенные извне). Эта реакция называется «антителозависимая
клеточная цитотоксичность».
В-лимфоциты.
Называются так потому, что
достигают зрелого состояния в костном мозге (bone
– кость). Эти клетки отвечают за синтез защитных белков – иммуноглобулинов
или антител. Созревая, B-лимфоциты проникают из крови в лимфатические узлы
и лимфатические фолликулы, в селезенку и в костный мозг, и превращаются в плазматические
клетки, которые синтезируют антитела, или иммуноглобулины.
NK-лимфоциты.
Название происходит от англ. Natural
Killer – «природный убийца». Основная функция NK-лимфоцитов
– уничтожение мутантных (опухолевых) или зараженных вирусными инфекциями
клеток собственного организма.
Моноциты.
Обычно содержание этих клеток
в крови не превышает 10% от общего числа лейкоцитов, тем не менее, это
самая многочисленная группа клеток иммунной системы в организме. Дело в
том, что основная масса моноцитов живет не в крови, а в органах и тканях, и
там их называют «тканевые макрофаги». К примеру, печень на 2/3 состоит из
тканевых макрофагов печени (так называемые Купферовские
клетки печени), головной мозг – практически наполовину (клетки нейроглии).
Основная функция моноцитов и макрофагов – фагоцитоз чужеродных частиц.
Особенно активно макрофаги «пожирают» вирусы и бактерии, уже «выявленные»
антителами против них. Кроме того, в отличие от нейтрофилов, макрофаги
способны подавать специальные сигналы Т-лимфоцитам о том, что они
обнаружили чужеродные антигены в организме, а Т-лимфоциты способны
запоминать эту информацию и запускать выработку антител к обнаруженным
макрофагами антигенам.
Иммунный ответ против большинства антигенов «стартует» с обязательным
участием макрофагов.
Эозинофилы.
Обычно содержание этих клеток
в крови не более 6% от общего числа лейкоцитов, или не более 300 клеток в 1
мкл крови. Основная функция эозинофилов – борьба с
гельминтами. В цитоплазме эозинофилов содержится огромное количество
гранул, содержащих чрезвычайно агрессивные протеолитические ферменты, в
частности – основный белок эозинофилов (произносится оснОвный
- ударение на 2-м слоге, от слова «основание» - щелочь). Основный белок
эозинофилов способен растворят кутикулу (плотную наружную оболочку)
гельминтов, и тем самым предохранять организм от инвазии гельминтами,
прежде всего от проникновения личинок и яиц гельминтов в ткани.
Базофилы.
Содержание этих клеток в крови
– до 1% от общего числа лейкоцитов. Также как и моноциты, основная масса
базофилов находится в тканях, где они называются «тучными клетками» или «гистиоцитами.
Основная функция гистиоцитов, также как и эозинофилов – борьба с быстро
передвигающимися паразитами – простейшими и личинками гельминтов, которые
могут активно внедряться в ткани через кожу и слизистые оболочки
дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта. Гистиоцит содержит в
цитоплазме большое количество гранул с гистамином – веществом, вызывающим
спазм сосудов, отек и воспаление в месте его выброса. Сами гистиоциты
скапливаются в подкожном и подслизистом слое
наподобие «минных полей».
Как только пытающийся проникнуть через кожу или слизистую паразит
наталкиваются на гистиоцит, тот выбрасывает гистамин, и в этом месте
моментально развивается отек, остановка кровообращения и воспаление.
Паразит лишается возможности передвигаться. В очаг воспаления, вызванный
базофилом-гистиоцитом, быстро собираются другие циркулирующие клетки
иммунной системы, в первую очередь эозинофилы и вместе атакуют попавшего в
ткань гельминта или одноклеточного паразита. Паразиты в таком очаге быстро
погибают, хотя при этом гибнут и собственные клетки организма. Но для
организма потеря небольшого количества собственных клеток вместе с
уничтожением паразита вполне оправдана – если паразит не уничтожить вовремя, он наделает еще больше бед.
В начало
|
Защитные белки в плазме крови
Антитела или
иммуноглобулины.
Иммуноглобулины представляют собой
достаточно крупные и сложные молекулы белков, которые синтезируются
клетками иммунной системы – плазматическими клетками. В свою очередь,
плазматические клетки происходят из B-лимфоцитов. Иммуноглобулины обладают
свойством связываться с чужеродными молекулами (белками, липопротеидами),
находящимися как в растворенном состоянии, так и на поверхности вирусов,
бактерий и т.п. Чужеродные молекулы могут находится
и на мембране своих собственных клеток, если эти клетки инфицированы
вирусами или мутировали.
Антитела сами по себе не могут убить вирус, бактерию или клетку, или
химически разрушить токсин, который выделяется бактериями. Но они могут,
во-первых, их нейтрализовать, нарушить функцию или снять токсичность;
во-вторых, «указывают» иммунной системе на «чужака», которого следует
уничтожить. После того, как антитела прореагировали с чужеродными
молекулами на поверхности вирусов, бактерий и др. объектов, в бой с ними
вступают белки системы комплемента, цитотоксические Т-лимфоциты или
клетки-фагоциты (нейтрофилы и моноциты-макрофаги).
При этом связывание антител очень избирательно – один вид антител реагирует
только с той чужеродной молекулой, против которой он вырабатывается. Это
свойство называется специфичностью антител. К примеру, антитела против
вируса кори не реагируют с вирусом ветряной оспы, и наоборот.
По химическому строению иммуноглобулины делятся на 5 классов:
Иммуноглобулины класса G.
Это основной класс защитных
антител, составляет более 80% всех антител, циркулирующих в крови и во
внутренней среде организма. Иммуноглобулины класса G начинают
вырабатываться примерно через 7 – 10 дней после первого контакта с незнакомой
инфекцией и их уровень нарастает до максимума примерно на 30 – 40 день.
Иммуноглобулины класса G долго сохраняются в крови, иногда их синтез
продолжается годами и десятилетиями, и как раз они обеспечивают
приобретенный иммунитет к большинству инфекций, как после заболевания, так
и после вакцинации. Иммуноглобулины класса G могут проникать через плаценту
к развивающемуся ребенку и накапливаться в крови ребенка перед рождением. В
этом имеется глубокий смысл, т.к. ребенок с материнскими антителами приобретает
и иммунитет против тех инфекций, с которыми контактирует мать в своем
обычном окружении.
Иммуноглобулины класса M.
Это наиболее крупные антитела,
и они вырабатываются в первую очередь при контакте с незнакомой инфекцией.
Иммуноглобулины класса M появляются в течение первых суток от начала
инфекции, заметный уровень создается уже к 3 – 4 дню, максимум – на 7 – 10
день, и затем, после уничтожения инфекции в организме, они быстро исчезают
– примерно через 4 – 6 недель. Иммуноглобулины класса M не проникают через
плаценту.
Иммуноглобулины класса A.
Эти так называемые секреторные
антитела. Они выделяются со слизью через слизистые оболочки в дыхательные
пути, по ходу желудочно-кишечного тракта, со слезной жидкостью на конъюктивы, с потом и салом на кожу. Основное
предназначение иммуноглобулинов класса A – уничтожать и блокировать
инфекцию до того, как она сможет проконтактировать
с покровными тканями организма и препятствовать
внедрению инфекции внутрь организма. Иммуноглобулины класса A не проходят
через плаценту. Иммуноглобулины класса A в значительных количествах
выделяются через молочные железы с грудным молоком (особенно высокая
концентрация IgA в молозиве), и предохраняют
слизистые оболочки новорожденного и грудного ребенка от инфекции.
Иммуноглобулины класса E.
Эти антитела также называют «реагинами». В крови их очень мало – менее 0,1% от всего
количества антител. Иммуноглобулины класса E из крови проникают в ткани,
где оседают на мембранах гистиоцитов («тучных клеток», см. базофилы). Если
гистиоцит сравнить с миной, то иммуноглобулины класса E – это
«чувствительные усики» на поверхности мины. Стоит какому-либо паразиту
задеть за такой «усик» и – гистиоцит «взрывается», выбрасывая из себя
гистамин и запуская воспаление в месте контакта с паразитом.
Иммуноглобулины класса D.
Концентрация этих антител в
крови также очень низкая – менее 1%. Иммуноглобулины класса D, в отличие от
остальных классов иммуноглобулинов, синтезируются не плазматическими
клетками, а самими лимфоцитами, и представляют собой слущенные
рецепторы с поверхности наружной мембраны лимфоцитов, по сути дела – это
обломки мембраны погибших лимфоцитов. Клиническое значение этих
иммуноглобулинов до настоящего времени не выяснено, поэтому их уровень
обычно не проверяют.
Белки системы комплемента.
Антитела или иммуноглобулины, как сказано выше, способны
связываться с вирусами и бактериями, но не способны их убивать. Способность
убивать бактерии, грибки и другие клетки есть у белков системы комплемента.
В системе комплемента насчитывают 9 основных и 2 дополнительных белка, все
они находятся в крови и готовы немедленно вслед за антителами атаковать
«чужаков».
Эти белки относятся к белкам-ферментам, а именно – к протеазам. Белки
системы комплемента способны, взаимодействуя между собой, собираться в своеобразную
«трубочку» или «иглу», которая протыкает оболочку вируса, микроба или
собственной инфицированной или ставшей чужеродной клетки именно в том
месте, где прореагировали антитела. Эта «игла» носит название
«мембранно-атакующий комплекс».
В результате в оболочке клетки образуется дырка. С учетом того, что с
микробом может одновременно прореагировать свыше 10000 молекул антител, в
нем одновременно образуется такое же количество «дырок» от белков. Под
электронным микроскопом поверхность клетки, которую атакуют антитела с
комплементом, выглядит как лунный пейзаж, изрытый кратерами от метеоритов.
Поскольку концентрация солей внутри микробной клетки выше, чем снаружи,
вода через поры в мембране устремляется внутрь микробной клетки и микроб в
буквальном смысле лопается, раздутый водой. Происходит лизис микроба, а его
останки поедают фагоциты.
Комплемент – это оружие «быстрого реагирования». Белки системы комплемента
вступают в реакцию немедленно, как только антитела обнаружат чужака. Это
важно для защиты от инфекции в ранах – если активность комплемента в
организме высока, то инфекция, попавшая в рану, будет уничтожена
практически моментально, и рана (защищенная от дальнейшего инфицирования
струпом из свернувшейся крови) не нагноится.
Лизоцим.
В организме вырабатываются специальные ферменты, способные
растворять оболочку бактерий, из них самый изученный – лизоцим (мурамилпептидаза). При растворении оболочки лизоцимом
микроб теряет свои патогенные свойства, не может дальше инфицировать
организм и становится более легкой мишенью для антител и комплемента и
более легкой «пищей» для фагоцитов.
Интерфероны.
Это особая группа белков, которую вырабатываются как клетками
иммунной системы (лейкоцитами), так и другими клетками организма, чаще
всего эпителиальными, если они инфицированы каким-либо вирусом. Интерфероны
предохраняют любые другие клетки организма от инфицирования вирусом. Иначе
любая вирусная инфекция приводила бы к тому, что инфицированными
становились все клетки организма.
C-реактивный белок.
Этот белок присутствует в крови в очень незначительном количестве,
но его количество увеличивается в десятки и сотни раз при появлении очага
бактериального воспаления. Поэтому С-реактивный
белок (читается Ц) относится к белкам «острой фазы». СРБ способен связывать
и «склеивать» между собой оболочки бактерий: в процессе размножения микробы
остаются склеенными между собой и образуют большой конгломерат из микробных
клеток. Во-первых, это не дает микробам разноситься с током крови и лимфы
по организму. Во-вторых, внутри такой «колонии» микробы не получают
достаточного количества питательных веществ и их рост и размножение
замедляется или останавливается вовсе. В-третьих, на налипший
на оболочке микробов С-реактивный белок фагоциты
реагируют повышенной активностью и начинают поглощать эти микробы с большей
жадностью.
В начало
|
Описание показателей иммунограммы
|
Концентрация иммуноглобулинов классов G, A и M.
Иммуноглобулинами называются молекулы антител. Антитела синтезируются
клетками иммунной системы, они способны связываться с чужеродными
молекулами (например, токсинами), вирусами, бактериями и пр. антигенами и
уничтожать их.
При первом контакте с антигеном (например, с новым вирусом гриппа)
у человека вначале начинают вырабатываться антитела класса M (на 3 – 4 день
от момента контакта). Затем начинают вырабатываться антитела класса G и
класса A (на 10 – 14 день). Антитела классов G и M циркулируют в крови, проникают в ткани
и в лимфу. Антитела класса G способны проникать через плаценту из крови
матери в кровь плода, и обеспечивают естественный пассивный иммунитет
ребенка сразу после его рождения и до 3 – 4 мес возраста. Следует иметь в виду, что ребенок
защищен только от тех инфекций, к которым выработался иммунитет у его
матери.
Антитела класса А секретируются на
поверхность слизистых дыхательной, пищеварительной, мочеполовой системы со
слизью, на поверхность конъюктивы глаз со слезной
жидкостью, на поверхность кожи с секретом потовых и сальных желез. Таким
образом, антитела класса A обеспечивают защиту слизистых и других покровных
тканей от инфекции извне.
Антитела класса A секретируются с грудным молоком и попадают в
носоглотку и желудочно-кишечный тракт грудного ребенка, обеспечивая ему дополнительный пассивный иммунитет к тем инфекциям,
к которым выработан иммунитет у матери ребенка.
При недостаточности иммуноглобулинов одного или нескольких классов
у человека возникает предрасположенность к инфекционным (вирусным и
бактериальным) заболеваниям.
Особенно часто обнаруживается недостаточность иммуноглобулина
класса A, что приводит к частым заболеваниям респираторной системы,
желудочно-кишечного тракта и мочевыводящих путей. Кроме того, у людей со
сниженным уровнем иммуноглобулина А часто
развиваются респираторные и пищевые аллергические реакции.
Следует обратить внимание на то, что иммуноглобулины
вырабатываются иммунной системой уже после первого попадания инфекции в
организм, не ранее 3 – 4 дня от момента начала инфекции. Поэтому
иммуноглобулины могут защитить организм от повторного заражения, но никак
не от самого первого контакта.
Определение концентрации иммуноглобулинов классов G, A, M в
сыворотке крови проводится методом радиальной иммунодиффузии
в геле. Этот метод был предложен Д.Манчини в 1957
году. Интересно, что в этом методе используется свойство антител вступать в
специфическое взаимодействие только с тем антигеном, против которого они
вырабатывались. Для получения антисывороток
иммуноглобулины из крови человека вводили овцам, а затем из крови овец получали
антисыворотку против иммуноглобулинов человека,
т.е. антигенами служат сами молекулы иммуноглобулинов.
На стеклянную пластину тонким слоем заливают гель (агара или агарозы) в котором
растворена антисыворотка, способная реагировать с
одним из исследуемых иммуноглобулинов. После застывания в геле с антисывороткой проделывают круглые лунки, в которые
вносят исследуемые сыворотки. Молекулы иммуноглобулинов сыворотки начинают
постепенно диффундировать в толщу геля по направлению радиально от центра
лунки и вступать в специфическое взаимодействие с антисывороткой
против иммуноглобулинов. При взаимодействии двух крупных белковых молекул
образуется осадок (преципитат), который виден невооруженным глазом.
Преципитат (осадок) откладывается вокруг лунки в виде кольца
и ширина кольца постепенно растет по мере диффузии в гель все новых и новых
молекул иммуноглобулинов. Когда все молекулы иммуноглобулинов из сыворотки продиффундируют в толщу геля и провзаимодействуют
с антисывороткой, рост кольца прекращается
(примерно через 2- 3 суток). В результате остается только измерить диаметр
образовавшегося кольца и перерассчитать его в
концентрацию соответствующего иммуноглобулина.
В начало
|
Активность комплемента.
Белки системы комплемента – это специальные ферменты, которые
способны уничтожать (лизировать, растворять)
бактерии, вирусы, клетки грибков и паразитов, атаковать и уничтожать
собственные клетки организма, пораженные инфекцией или ставшие чужеродными
из-за мутации.
Белки системы комплемента вступают в реакцию «по цепочке» один за
другим, образуя так называемый «мембранно-атакующий комплекс». Под
электронным микроскопом «мембранно-атакующий комплекс» построенный из
белков комплемента выглядит как игла, которая протыкает клеточную оболочку
микроба или другой клетки. Через образовавшееся отверстие внутрь клетки
микроба устремляется вода и клетка лопается, как
перекачанный воздушный шарик и внутренне содержимое клетки через разрывы ее
оболочки вытекает наружу.
Комплемент – очень эффективное и постоянного
готовое к бою оружие против микробов. К примеру, при возникновении ранения и попадании микробов в рану
именно белки системы комплемента немедленно начинают атаку против попавших
в рану микробов, и если рана небольшая и не сильно загрязнена микробами, им
удается справиться с инфекцией и рана не нагнаивается.
Аналогично происходит при хирургических операциях:
какие бы стерильные условия в операционной не создавались и как бы
тщательно не обрабатывали кожу пациента перед разрезом, в рану всегда
попадают микробы, которые живут в порах в глубоких слоях кожи. При
недостаточности системы комплемента эти микробы не уничтожаются, а имеют
возможность размножиться и вызвать нагноение раны, что может быть весьма
опасно для пациента.
Белки системы комплемента могут атаковать микробы как вместе с
антителами, взаимно усиливая действие друг-друга,
так и сами по себе, поэтому комплемент относят к неспецифическим системам
защиты.
Всего насчитывают 9 основных и 2
дополнительных белка системы комплемента. Обычно исследование уровня
индивидуально каждого белка не производится, а исследуют их общую
(суммарную) активность по способности растворять тестовые клетки-мишени.
Для исследования активности комплемента сыворотку крови пациента
смешивают с «гемолитической системой», т.е. клетками, которые под действием
комплемента будут растворяться. В качестве гемолитической системы
используют свежие эритроциты барана (кровь у барана получают также как и у
человека – из вены). Эритроциты обрабатывают антисывороткой
против эритроцитов барана, чтобы антитела связались на поверхности
эритроцитов («сенсибилизированные эритроциты»).
После взаимодействия комплемента из сыворотки крови пациента с
сенсибилизированными эритроцитами последние лопаются (происходит гемолиз
эритроцитов). Осуществляют подсчет количества лизированных
эритроцитов или измерение количества «вытекшего» из эритроцитов
гемоглобина. Количество разрушенных эритроцитов и уровень свободного
гемоглобина в пробирке после завершения реакции пропорционально количеству
образовавшихся активных мембранно-атакующих комплексов из комплемента.
В начало
|
Ревмофактор.
К сожалению, иммунная системы способна не только отражать внешнюю
и внутреннюю угрозу, но и при определенных заболеваниях поражать
собственные нормальные, здоровые, не мутированные клетки и ткани. Это
называется аутоиммунное (или инфекционно-аллергическое) поражение, при этом
развивается аутоиммунное заболевание, обычно хронического характера.
Провоцировать такую атаку на собственные ткани организма могут
различные возбудители. Самый распространенный пример – это ревматизм, когда
стрептококки, вызывающие воспаление горла в виде ангины, провоцируют
появление антител с собственной соединительной ткани. Эти антитела
накапливаются в большом количестве и атакуют клапаны сердца (может
развиться порок сердца), оболочки кровеносных сосудов сердца и головного
мозга (вызывая миокардит и хорею), сосуды почек (ревматическое поражение
почек – нефрит), ткань щитовидной железы (развивается тиреоидит),
и поверхность суставов и связок (ревматический полиартрит). Самих стрептококков в организме уже может
и не быть, а ауто-антитела
могут сохраняться месяцами и годами, вызывая аутоиммунное заболевание.
Иногда атака развивается, как следствие наследственного
заболевания самой иммунной системы (при аутоиммунной миастении – миастении гравис).
Отличить чисто инфекционное воспаление от
инфекционно-аллергического позволяет исследование уровня ревмофактора. Ревмофактором
называются антетела, которые способны реагировать
с другими антителами самого человека (в норме антитела сами с собой не
реагируют).
Высокий уровень ревмофактора является
симптомом заболевания, которое называется ревматоидный
полиартрит (поражение суставов и соединительной ткани), незначительно
повышенный – обычно возникает при любом хронически протекающем инфекционном
воспалении, т.к. из-за длительного раздражения иммунной системы начинают
появляться ауто-антитела
в небольшом количестве.
Для исследования уровня ревмофактора
сыворотку крови пациента титруют с физраствором
(делают последовательно возрастающие разведения сыворотки с физраствором, например 1:20 – на 1 часть сыворотки 20
частей физраствора, 1:40 – на 1 часть сыворотки
40 частей физраствора и т.д.). Далее, к раститрованной сыворотке прибавляют по капле суспензии
латексных частиц, на поверхности которых адсорбированы иммуноглобулины.
Если в крови есть антитела против иммуноглобулинов, то эти антитела начнут реагировать
с иммуноглобулинами на поверхности латексных частиц и склеивать латекс
между собой; это называется агглютинация. В результате отмечают то
разведение (титр) сыворотки, в котором реакция агглютинации еще заметна.
Например, если титр ревмофактора 1:320, это
значит, что количество антител против иммуноглобулинов в сыворотке крови
данного пациента было таким, что вызывало агглютинацию латексных частиц при
разведении сыворотки в 320 раз.
В начало
|
Фагоцитарная активность нейтрофилов
Способность белых клеток крови (лейкоцитов) поглощать и
переваривать чужеродные частицы (вирусы, бактерии и пр.) называется
фагоцитоз. Это очень важный защитный механизм иммунной системы:
- во-первых, фагоцитоз – неспецифический механизм защиты, т.е.
этот механизм защищает организм как при самом
первом контакте с инфекцией, так и при повторных контактах.
- во-вторых, в подавляющем большинстве случаев, прежде чем начнут
вырабатываться антитела, иммунной системе необходимо, чтобы вирус или
микроб был съеден клетками-фагоцитами; полученная в результате такой
«дегустации» информация передается остальным клеткам иммунной системы, и
только затем начинается выработка антител. Т.е. при нарушениях фагоцитоза
страдают и другие звенья иммунной системы;
- в-третьих, при помощи фагоцитоза происходить очищение внутренней
среды организма от своих собственных состарившихся, погибших и поврежденных
клеток, от накопившихся нерастворимых «шлаков», продуктов неполного распада
белков и нуклеиновых кислот и пр. При нарушениях фагоцитоза, как правило,
развивается состояние «аутоинтоксикации» - самоотравления организма
продуктами собственного обмена веществ.
Для исследования фагоцитоза в лаборатории в пробирке смешивают каплю крови пациента и каплю взвеси культуры
стафилококков – создается «лабораторный сепсис» в капле крови. Находящиеся
в крови антитела и белки системы комплемента покрывают стафилококки, а
затем их начинают поедать нейтрофилы, т.е. так, как это происходило бы в
организме самого пациента. Через определенные промежутки времени из капли
крови готовят мазки, мазки высушивают, красят специальными красителями и
исследуют под микроскопом.
Под микроскопом подсчитывают количество нейтрофилов, фагоцитировавших хотя бы по одному микробу (активные
фагоциты), сколько микробов съел каждый из таких активных фагоцитов
(фагоцитарное число), и сколько микробов каждый из фагоцитов переварил
(индекс переваривания).
Зная количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу крови, можно
подсчитать также фагоцитарную емкость крови – какое количество микробов
может быть успешно фагоцитировано 1 литром крови.
В начало
|
Содержание T-, B- и NK-лимфоцитов в крови.
Пытаться описать функции лимфоцитов вкратце, все равно, что
пытаться из симфонии сделать мелодию для сотового телефона. Поэтому
постараемся хотя бы обозначить, что делают эти клетки:
Т-лимфоциты – выполняют функции «диспетчеров» иммунного ответа,
отвечают за кооперацию клеток разных типов при иммунном ответе на один и
тот же антиген; вместе с моноцитами (макрофагами) запускают иммунный ответ
на впервые выявленный антиген; выделяют множество химических сигналов –
специальных белковых молекул, передающих информацию от одной клетки к
другой; один из видов Т-лимфоцитов – цитотоксические Т-лимфоциты – способны
убивать клетки собственного организма, если на этих клетках обнаруживаются провзаимодействовавшие с мембраной клетки антитела;
B-лимфоциты – получают сигналы от Т-лимфоцитов и превращаются в
плазматические клетки, которые синтезируют и выделяют в кровь разнообразные
антитела. При этом из одного B-лимфоцита получается огромный клон
плазматических клеток, каждая клетка из клона производит антитела абсолютно
идентичные друг другу.
NK-лимфоциты – осуществляют надзор за генетическим постоянством
собственных клеток организма, обнаруживают и немедленно убивают мутантные и
опухолевые клетки.
Исследование содержания субпопуляций
лимфоцитов основано на том, что, хотя разные типы лимфоцитов под
микроскопом и выглядят совершенно одинаково, на их мембране имеются разные
белковые молекулы, в соответствии с разными функциями этих клеток. Чтобы
выявить эти молекулы, используют моноклональные
антитела, помеченные флюоресцирующей меткой. Если соответствующее антитело
связалось с мембраной лимфоцита (а значит, на мембране есть именно тот
белок, который отличает, к примеру, NK-лимфоцит от всех остальных клеток),
клетка начинает светиться под действием ультрафиолетовых лучей при
наблюдении в люминесцентном микроскопе или обработке на специальном
приборе, который называют «проточный цитофлюориметр».
В начало
|
Реакция бласттрансформации лимфоцитов
Лимфоциты проходят 2 периода деления:
Первый период связан с выработкой новых лимфоцитов в костном
мозге. Лимфоциты вырабатываются в костном мозге из стволовых клеток и
проходят несколько стадий деления. Делящиеся в костном мозге клетки
называют «бластами». Лимфоциты делятся,
дифференцируются и созревают в костном мозге до того момента, пока станут
«зрелыми» и смогут распознавать и бороться с различными антигенами. Тогда
они покидают костный мозг и выходят в циркуляцию по организму – на «охоту»
за антигенами.
Второй период деления лимфоцитов связан с их реакцией на антигены.
Один лимфоцит за свою жизнь может реагировать только один раз на
один-единственный антиген, к которому этот лимфоцит «специфичен».
Представьте себе охотников, каждый из которых охотится только на одного
зверя и в ружье у него только один патрон. Вот это и есть лимфоциты.
Поэтому, если нужно перестрелять «стадо бизонов», уже зрелые
лимфоциты – «охотники на бизонов» начинают размножаться, при этом они
претерпевают превращение обратно в бласты – «бласттрансформацию». В результате бласттрансформации
и последующего размножения из одного «охотника на бизона» их получается
целый полк, дивизия или армия – столько, сколько надо для того, чтобы
перестрелять всех «бизонов». Потомки одного лимфоцита называются клоном,
они все являются точными генетическими копиями друг друга.
Если в организме обнаружилось не «стадо бизонов», а «стая
крокодилов» - точно также начинают размножаться «охотники на крокодилов», и
образуется уже совсем другой клон.
А если способность к бласттрансформации
нарушена или вообще утрачена? В этом случае в организме не сможет
образоваться нужного количества защитных клеток и организм не сможет
победить проникшую в него инфекцию.
Некоторые инфекции – вирус Эпштейна-Барр
(вирус инфекционного мононуклеоза) или вирус СПИДа сами по себе вызывает
массовую бласттрансформацию лимфоцитов разной антигенной специфичности. Такая патологическая бласттрансформация называется «поликлональной».
В лабораторных условиях можно проверить способность лимфоцитов у
конкретного пациента претерпевать бласттрансформацию.
Для этого из пробы крови пациента выделяют лимфоциты, их обрабатывают
специальными веществами – стимуляторами бласттрансформации.
Общепринято использовать фитогемагглютинин (ФГА, PHA)
для бласттрансформации T-лимфоцитов и конканавалин А (кон А, con A) для бласттрансформации
B-лимфоцитов, но могут использоваться и другие стимулы.
При поражении конкретного пациента конкретной инфекцией (например,
при рецидивирующей стафилококковой инфекции), можно проверить способность
лимфоцитов к бласттрансформации с антигеном
стафилококка (т.е. к моноклональной бласттрансформации). Если лимфоциты пациента не
реагируют бласттрансформацией на антиген
конкретной инфекции, говорят об изолированной иммунной толерантности к
данному антигену (или об изолированном иммунодефиците к данному антигену).
В начало
|
Реакция торможения миграции лейкоцитов
Все лейкоциты – белые клетки крови, постоянно мигрируют в
организме в поисках антигенов – в крови, из крови в ткани, из тканей – в
лимфу, в лимфоузлы и обратно в кровь. Но в нужный
момент – при возникновении очага инфекции – они должны скапливаться там,
где они в них повышенная потребность. В организме это происходит в результате
появления в очагах инфекции специальных химических сигналов – хемоаттрактантов. Хемоаттрактанты
выделяются уже прореагировавшими (вступившими в бой) с инфекцией
лейкоцитами, и они привлекают в очаг инфекции все новых и новых лейкоцитов.
В лабораторных условиях можно проверить способность лейкоцитов
конкретного пациента вырабатывать хемоаттрактанты
и реагировать на них. Этот тест называется «реакция торможения миграции
лейкоцитов» - при положительной реакции можно видеть, что лейкоциты не
мигрируют от места проведения реакции в лунке геля или в стеклянном
капилляре (миграция заторможена), а в контроле – есть отчетливая зона
миграции (расползания) лейкоцитов в разные стороны.
Если в лейкоцитах нарушена способность вырабатывать хемоаттрактанты, или способность на них реагировать,
накопления лейкоцитов в очаге инфекции происходить не будет
и инфекция не будет побеждена.
Иногда встречается ситуация, когда хемоаттрактанты
вырабатываются лейкоцитами на те стимулы, которые у здоровых людей никаких
реакций не вызывают. К примеру, антибиотики – при реакции лейкоцитов с
пенициллином в норме никакой реакции не происходит, а при аллергии на
пенициллин – развивается реакция торможения миграции. Если такому пациенту
будет сделана внутримышечная инъекция пенициллина – он выдаст выраженную
аллергическую реакцию, а в месте инъекции образуется инфильтрат, а может
быть и абсцесс. Кстати, в большинстве случаев инфильтраты в местах инъекций
антибиотиков – ничто иное, как аллергическая реакция на лекарство (это
можно подтвердить и лабораторными тестами), а не «неряшливость» медсестер.
В начало
|
|
|
|
Последнее обновление: 07.10.2010
|
|
|